071760 致泻大肠埃希氏菌生化鉴定盒(8种×10次)
一)整套试剂及用品
鉴定生化反应的8种试剂(表1)、10瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、10支一次性吸管
二)生化管的使用方法
开启西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在无菌条件下，按铝盖上的箭头方向打开铝盖，撕开铝盖，打开西林瓶胶塞(如图1)。
所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
注意：氰化钾生化管，应尽量将塑帽套紧，以免氰化钾挥发造成假阳性!
三)致泻大肠埃希氏菌生化鉴定盒的详细使用方法
致泻大肠埃希氏菌仅是大肠埃希氏菌中的一小部分。挑取平板分离的可疑的菌落进行革兰氏染色镜检，将疑是致泻大肠埃希氏
菌的新鲜菌苔置于已配备的无菌生理盐水中，与0.5 McFarland的浊度管比浊，将菌悬液制备成0.5McFarland ( 约108cfu/mL )，用吸管吸取2滴(约0.06mL)菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞，一般采用全加塞(如图2左两瓶所示)，特殊情况在下表注明采用半加塞(如图2右两瓶所示)，直立于内托的凹槽内(如图2)，或放置于合适的瓶架中，于35-37℃培养箱中培养，结果观察见表1。
注意：如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式，请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
三)致泻大肠埃希氏菌生化鉴定特征 (详见下生化鉴定程序图)
1. 致泻大肠埃希氏菌生化鉴定程序图：
2.血清学试验
假定试验：挑取经生化试验证实为大肠埃希氏菌的琼脂培养物，用肠道致病性大肠埃希氏菌、肠道侵袭性大肠埃希氏菌和产肠毒素大肠埃希氏菌多价O血清和肠道出血性大肠埃希氏菌O157血清作玻片凝集。当与某一种多价O血清凝集时，再与该多价血清所包含的单价O血清作试验。致泻大肠埃希氏菌所包括的O抗原群见表2。如与某一个单价O血清呈现强凝集反应，即为假定试验阳性。
证实试验：制备O抗原悬液，稀释至MacFarland 3号比浊管相当的浓度。原效价为1：160～1：320的O血清，用0.5%盐水稀释至1：40。稀释血清与抗原悬液再10mm×75mm试管中等量混合，做单管凝集试验。混匀后放于50℃水浴箱内，经16h后观察结果。如出现凝集，可证实为该O抗原。
