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细菌新型生化鉴定管使用说明
―― 070080 霍乱弧菌生化鉴定盒(11种×10次)管
一)霍乱弧菌生化鉴定盒 整套试剂及用品
鉴定生化反应的11种试剂及配套试剂4种(表1)、0.85%无菌生理盐水10瓶、0.5 McFarland的浊度管1瓶、一次性吸管10支。
二)生化管的使用方法
开启西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开铝盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞(如图1)。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
三)霍乱弧菌生化鉴定盒的详细使用方法
挑取平板分离的可疑菌落进行革兰氏染色镜检,将疑是霍乱弧菌的新鲜菌苔置于已配备的无菌生理盐水中,与0.5 McFarland的浊度管比浊,将菌悬液制备成0.5McFarland ( 约108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(约0.06mL)菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞,一般采用全加塞(如图2左两瓶所示),特殊情况在下表注明采用半加塞(如图2右两瓶所示),或放置于合适的瓶架中,于35-37℃培养箱中培养,结果观察见表1。注意:如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式,请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
表1 | ||||
产品名称 | 结果判定 | 培养时间(小时) | 使用说明 | |
阳性 | 阴性 | |||
1%NaCl葡萄糖产气 | 小倒管有气泡 | 小倒管无气泡 | 18-24 | 使用前先确定小倒管内无气泡 |
1%NaCl葡萄糖磷酸盐胨水(VP) | 红色 | 不变色 | 48 | 培养后依次加入10 滴 VP试剂甲液及4滴乙液,混匀,再培养 10-20分钟观察结果。 |
1%NaCl蛋白胨水 | 红色 | 不变色 | 24 | 培养后加靛基质试剂2-3滴,立即观察结果。 |
1%NaCl 蔗糖、1%NaCl甘露糖、1%NaCl阿拉伯糖、1%NaCl肌醇 | 黄色 | 紫色 | 18-24 | |
1%NaCl赖氨酸脱羧酶 | 试验管蓝绿色,对照管变黄 | 试验管与对照管均变黄 | 18-24 | 每株被检菌应同时接种氨基酸对照管一支,并加灭菌液体石蜡3-4滴覆盖培养基表面。培养18-24小时,未见阳性结果,继续培养48h,再做最终结果判定。 |
1%NaCl精氨酸双水解酶 | 试验管蓝绿色,对照管变黄 | 试验管与对照管均变黄 | 18-24 | 使用方法(同上)。 |
备注:本鉴定盒是按照环凯产品目录中的品种成份从左到右的顺序摆放。 |
四)霍乱弧菌生化鉴定特征见表2