产品名称：DNA Gel/PCR Purification Kit
产品编号与包装规格：
| 编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 价格 |
| HKDK005-01A | DNA Gel/PCR Purification Kit | 50次 | DNA凝胶/PCR 纯化试剂盒 | 223 |
产品描述：本试剂盒采用独特的离心吸附柱，既能从 TAE 或 TBE 琼脂糖凝胶中回收 DNA 片段，又能用于直接纯化 PCR 产物。溶液PC 中含有 pH 指示剂，可根据颜色来判断溶胶或 PCR 产物回收是否达到最佳状态。使用本产品可回收 100 bp-20 kb 大小的DNA 片段，回收率可达 80%。使用本试剂盒回收的 DNA 可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。
使用建议：如果所提质粒为低拷贝质粒或大 10kb 的大质粒，应加大菌体使用量，使用5～10mL 过夜培养物，同时按照比例增加 P1、P2、P3 的用量，洗脱缓冲液EB 应在65～70℃水浴预热，在吸附和洗脱时可以适当的延长时间，以增加提取效率。其它步骤相同。
注意事项：
1、 溶液PC 在低温运输或者保存过程中可能会生成沉淀，如果有沉淀生成，请在37 ℃溶解再使用。
2、 洗脱前，在55-60℃水浴预热洗脱缓冲液EB（Buffer EB)。
保存温度：该试剂盒在室温条件下，可保存 12 个月，更长时间保存可置于 4℃。 若溶液产生沉淀，可在室温下放置一段时间，或在 37℃水浴中预热 10min，以溶解沉淀。
DNA Gel/PCR Purification Kit 产品包装（A包装）：
| 产品组成 | 体积 |
| Buffer PC | 25mL |
| Buffer PW | 15mL |
| Buffer EB | 10mL |
| Spin Columns | 50 个 |
| Collection Tubes | 50 个 |
实验步骤：
漂洗液 PW 在使用前按照试剂瓶所示加入 60 mL 无水乙醇，混合均匀。
1，
a，琼脂糖凝胶产物纯化：将切割的凝胶转入干净的离心管中，加入等体积的溶液 PC（如果凝胶重为 0.1 g，其体积可视为 100 μL，则加入100 μL PC 溶液），放入55-60℃水浴中，间断摇晃混合，直至凝胶完全融化（约5-10min），放置使其冷却至室温。
b，PCR 产物纯化：在 PCR 反应液或酶切反应液中加入 2 倍体的溶液 PC，充分混匀。纯化小于200bp 的片段，加入 5 倍体积的溶液PC 到1 倍体积的PCR 反应液。
注意：
100mg 凝胶块需加入 100μL的溶液PC，确保加入不小于 1 倍体积的溶液PC；
纯化小于 200bp 的片段，加入 1 倍体积的异丙醇（100mg 凝胶块或100μLPCR 反应液加入100μL异丙醇）。
2，转移以上混合液（每次不超过700μL）至一个带有收集管（Collection Tube）的吸附柱（Spin Column）中，室温下，13,000 rpm 下离心1min，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
3，重复步骤2，直至剩余的混合液全部通过吸附柱。
4，加入350μL 漂洗液 PW(Buffer PW)至吸附柱中，室温下13,000 rpm下离心 30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
5，重复步骤4。
6，室温下，13,000 rpm 下，将吸附柱开盖离心 2min，除去残留的乙醇。
注意：开盖离心有利于乙醇的去除，乙醇的残留将影响下游实验，可以适当延长离心时间，并且离心后开盖空气中放置几分钟。
7，转移吸附柱至一个新的1.5mL 收集管中，加入30-50μL 60℃预热的洗脱缓冲液 EB（Buffer EB)或ddH2O 至吸附柱膜中央，室温静置 1min，13,000 rpm下离心 1min 以洗脱 DNA，如果想提高收获量，将洗脱液加入到吸附柱中重新洗脱一次。
注意：洗脱体积不应小于30μl，体积过少影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若后续做测序，需使用ddH2O做洗脱液，并保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA 降解。DNA也可以用缓冲液(10mM Tris-Cl, pH8.0) 洗脱。为了提高DNA的回收量，可将离心得到的溶液重新加回离心吸附柱中，室温放置2min，13,000rpm离心2min，将DNA溶液收集到离心管中。
