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新品发布于 | 环凯 细胞培养基系列产品强势上市!

发布时间:2022-03-29      浏览次数:818    分享:

环凯生物针对细胞系的营养需求研发出多种经典的细胞基础培养基,已有DMEM、MEM、RPMI1640、DMEM/F-12等系列细胞培养基产品,特别添加能有效改善细胞生长状态的营养物质和针对不同物种甄选的优质组分,适合各类哺乳细胞系的体外培养。

细胞基础培养基

环凯研发的细胞培养基,可根据以下不同指标进行配置,满足各类哺乳细胞系的细胞培养:

  • 高/低/无-葡萄糖浓度
  • 含/不含L-谷氨酰胺或L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(G-MAX)
  • 含/不含丙酮酸钠
  • 含/不含酚红pH指示剂

以下是环凯关于细胞培养系列相关产品介绍:

细胞培养基

1、DMEM

DMEM是一种由Dulbecco改良Eagle培养基得到的广泛使用的基础细胞培养基,适用于多种哺乳动物细胞培养,包括成纤维细胞、神经元细胞、神经胶质细胞、平滑肌细胞,以及HeLa、293、Cos-7和PC-12等细胞系。

DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的细胞培养基,是在MEM细胞培养基的基础上研制的。与MEM相比增加了各种成分用量。DMEM分为高糖型(高于4500 mg/L)和低糖型(低于1000 mg/L)。高糖型具有利于细胞贴壁,适于生长较快、高密度培养等优点;低糖型更适合代谢作用较慢、葡萄糖需求低的细胞的培养。

DMEM

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DMEM产品目录

2、MEM

MEM细胞培养基是一种添加了营养物的极限必需培养基(也称最低必需培养基、最小基本培养基或低限量Eagle培养基),仅含有12种必需氨基酸、L-谷氨酰胺和8种维生素。MEM是一种最基础、最常用的细胞培养基,主要应用于贴壁细胞的培养,在添加血清后,可用于培养多种单层生长的细胞,如成纤维细胞。修改配方后的MEM α则可广泛应用于各种哺乳动物悬浮和贴壁细胞培养。

MEM产品对比

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3、RPMI 1640

RPMI是洛斯维·帕克纪念研究所(Roswell Park Memorial Institute)的缩写,RPMI 1640是该研究所研发的一类细胞培养基,1640是培养基代号。开发RPMI 1640的初衷是用于人白血病细胞的悬浮或单层培养,后来被发现也适用于多种哺乳动物细胞,包括Hela、Jurkat、MCF-7、PC-12、PBMC、星型胶质细胞和肿瘤细胞,尤其适用于悬浮细胞培养,是一种广泛应用的细胞培养基。

RPMI 1640细胞培养基与其他培养基的区别在于含有还原型谷胱甘肽和高浓度维生素、生物素、维生素B12和对氨基苯甲酸。RPMI 1640细胞培养基中的氯化胆碱和肌醇也高于其他细胞培养基。

1640培养基产品对比

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4、DMEM/F-12

Ham's F-12细胞培养基最初用于CHO细胞的无血清培养,其含有一些传统基础培养基没有的成分,如腐胺、次黄嘌呤、胸苷、锌等;在低血清含量下,适用于单细胞培养和克隆化培养;添加血清后,也广泛应用于癌细胞和原代细胞培养,如大鼠肝细胞、大鼠前列腺上皮细胞、软骨细胞、大鼠成肌细胞和鸡胚胎细胞等。

DMEM/F-12细胞培养基是由DMEM细胞培养基和Ham's F-12细胞培养基1:1混合而成,在DMEM细胞培养基的基础上添加Ham's F-12细胞培养基,使其含有更为丰富的营养成分和多种微量元素。目前被广泛用于多种哺乳动物细胞的生长,包括MDCK、神经胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞和大鼠成纤维细胞等;同时DMEM/F-12细胞培养基是无血清培养基的基础,也适用于低血清含量的哺乳动物细胞培养。

F12培养基产品对比

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5、M199

M199 细胞培养基起初用于鸡胚成纤维细胞的营养研究,具有广泛的物种适用性,特别适用于非转化细胞的培养。M199 细胞培养基针对广泛的细胞培养应用,提供多种组分的改良培养基,常用于病毒学、疫苗生产以及小鼠胰腺上皮和大鼠晶状体组织的原代组织块体外培养。

M199培养基

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细胞培养基配套试剂

1、HEPES 溶液

作用:pH缓冲剂
HEPES是一种弱酸,中文名字是4-羟乙基哌秦乙硫磺酸,对细胞无毒性,主要作用是防止培养基pH迅速变动。在开放式培养条件下,观察细胞时培养基脱离了5% CO2的环境,CO2气体迅速逸出,pH迅速升高,若添加了HEPES,此时可以维持pH 7.0左右。一般在进行克隆化培养时需要添加HEPES。

2、L-谷氨酰胺溶液

作用:参与蛋白质的合成,也为合成核酸提供碳源,是细胞的重要能量来源

谷氨酰胺是一种不稳定的氨基酸,在中性的水溶液中会自发降解;需要频繁地补加L-谷氨酰胺。因而在培养操作过程中可能会出现以下状况:
      1)频繁打开盖子,增加了破坏无菌状态的可能性;
      2)过多的追加L-谷氨酰胺,增加了培养基中氨的毒性水平。

解决方案:
      ➢选择不含谷氨酰胺的培养基,使用前自行添加L-谷氨酰胺。
      ➢选择含有更稳定的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺培养基代替。

3、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺溶液

作用:参与蛋白质的合成,也为合成核酸提供碳源,是细胞的重要能量来源
丙氨酰-L-谷氨酰胺溶液(二肽谷氨酰胺)在细胞培养中稳定存在,可高压灭菌,释放毒性氨少;在细胞内会被氨肽酶所水解,产生L-谷氨酰胺和L-丙氨酸;因此在大部分细胞系统中二肽谷氨酰胺就可以像L-谷氨酰胺一样有效地被利用。二肽谷氨酰胺是L-谷氨酰胺最优替代物,它无需适应;既可用于贴壁细胞培养,也适合于悬浮细胞的培养。

4、丙酮酸钠

作用:能量来源
丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,在葡萄糖不足时,细胞会代谢丙酮酸钠,从而保证细胞可以更好的生长。由于细胞在糖酵解途径中将丙酮酸钠作为中间代谢物,因此它不是所有细胞培养所需要的添加剂,属于非必需组分。

5、非必须氨基酸溶液

作用:促进细胞增值代谢,降低细胞培养时细胞自身生产非必须氨基酸的副作用
非必须氨基酸溶液包含L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天门冬酰胺、L-天门冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种非必须氨基酸(NEAA)。添加NEAA能有效改善细胞培养基配比,降低细胞培养时细胞自身生产非必须氨基酸的副作用,促进细胞增殖代谢,是细胞培养中常用的添加剂之一。

6、胰蛋白酶

作用:使组织或贴壁细胞离散成单个细胞
胰蛋白酶是一种丝氨酸水解酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切段,水解细胞间的蛋白质,破坏细胞间的连接,从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。胰酶作用及溶解的最佳pH为8-9,配制胰酶溶液应将液体调至pH 8左右,充分溶解,过滤除菌。过滤后可以再调至pH 7 .5,也可不调。一般常用胰酶工作浓度为0.25%,而半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用低浓度(0.05%)的胰酶进行细胞消化。

7、Cell counting kit-8

作用:测定细胞增殖和细胞毒性中的细胞活力
细胞增殖试验广泛应用于评估细胞周期调节因子,如生长因子、细胞因子、有丝分裂物和药物,尤其适用于活性细胞的定量检测。细胞计数试剂盒(CCK-8)可灵敏地测定细胞增殖和细胞毒性中的细胞活力。四唑盐WST-8 被细胞内的脱氢酶还原生成黄色甲臜产物,可溶于培养基中。细胞中脱氢酶的活性所产生的甲臜产物的数量与活细胞的数量成正比WST-8灵敏度高于其他四唑盐,如 MIT、XTT、WTS 或 WST-1。

8、PBS缓冲液

作用:用于消化细胞前和培养过程中的细胞的洗涤、溶液配制和其他常规用途
PBS缓冲液,是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,一般作为溶剂,起溶解、保护试剂的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二级解离,缓冲的pH值范围很广,而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。还可根据需要补加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2至PBS溶液中以提供二价阳离子。

产品信息:

细胞培养相关配套试剂

胎牛血清

由于基础培养基中缺少某些营养物质和生长因子,导致细胞无法得以生长并维持生长状态,无法存活。因此基础培养基常常需要添加终浓度为5-20%的血清。

添加血清的作用有:

  1. 提供基础营养物质;
  2. 提供贴壁和扩展因子;
  3. 提供激素及各种生长因子;
  4. 提供结合蛋白;
  5. 对培养中的细胞提供某些保护作用。

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