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细胞培养常用耗材简介

发布时间:2024-01-17    浏览次数:537

贴壁培养和悬浮培养 

在认识细胞的“住所”之前,我们先了解下细胞的2D培养体系,目前主要有两种基本的细胞培养体系,其中一种比较多的培养体系是使细胞在一定底物上单层生长 (即:贴壁培养),另一种是使细胞在培养基中自由漂浮生长 (悬浮培养)。3D细胞培养体系以后进行介绍。

贴壁培养和悬浮培养

贴壁细胞需要贴附在一个固相界面上才能生长,而只有亲水的固相界面,细胞才能贴附。像玻璃的表面是亲水的,所以不需要做特殊处理,就可以用于贴壁细胞,但是由于玻璃的材质易碎、重复使用比较麻烦、重复使用会增加污染概率等不足的地方,逐渐发展到现在选择了PS(聚苯乙烯)替代,由于PS(聚苯乙烯)的表面是疏水的,所以这个固定界面必须经过特殊处理(例如:中文名:TC处理,英文名:Tissue-culture treated),以便细胞粘附和伸展 (即:组织培养处理)。经过表面的改性处理,适合贴壁细胞的培养。而悬浮生长的细胞,就不一定需要这样经过特殊处理过的器皿。但经过表面的改性处理后的细胞培养容器等一般也适合悬浮细胞的培养。

下面介绍细胞培养中所需要的一些耗材

0细胞培养器皿

常见的有三种,细胞培养瓶(或称易用培养瓶)、细胞培养板、细胞培养皿

细胞培养瓶、细胞培养板、细胞培养皿

无论是细胞培养器皿,必须要做到无DNA酶,无RNA酶,无热原,无毒素认证,无菌级别达10-6,材质无生物污染融出物质等要求。

除了常用的细胞培养瓶/板/皿之外,还有一些特殊的细胞培养容器或工具,比如:Transwell小室、细胞爬片、共聚焦小皿,像规模化细胞培养耗材还有:多层培养瓶、细胞工厂、滚瓶、培养袋等。对这些特殊产品的应用有兴趣的小伙伴可以关注环凯公众号,以后会在文中介绍。  以下是以Hela细胞为例给出的各培养器皿的可获细胞数量,仅供参考。

细胞培养瓶/板/皿

0离心管(无菌)

英文名称:centrifugal tube 或 centrifuge tube,细胞培养中,用户分离细胞及其他溶液。离心管按照底部形状,分为平底离心管和圆底离心管;按照盖子闭合方式,分为压盖离心管和螺旋盖离心管。常用于细胞培养的离心管主要是15ml和50ml的螺旋盖尖底离心管。离心管必须要做到无DNA酶,无RNA酶,无热原,无毒素认证,无菌级别达10-6,材质无生物污染融出物质等要求。

环凯离心管

0移液管(无菌)

英文名称:transfer pipette,细胞培养过程中,往往需要进行较大体积的液体操作,由于操作的简便性,各种规格的移液管几乎成为细胞培养室的必备用品之一。

早期的移液管为玻璃制品,可以高温高压灭菌并反复使用,但是由于玻璃制品的易碎性以及反复灭菌潜在的风险,目前许多细胞培养室已经基本放弃使用玻璃制的移液管,而采用更加方便、安全、准确的一次性塑料制移液管。无论是哪种移液管,必须要做到无DNA酶,无RNA酶,无热原,无毒素认证,材质无生物污染融出物质等要求。

配合移液管使用从而实现较大体积液体操作的常用工具是洗耳球或者电动移液管移液器。如今绝大多数用户使用的是电动移液管移液器,但电动移液器是采用手动控制吸、排液操作,在排液末端,由于压力过小的原因,往往会有部分液体不能彻底排净,同时由于其吸取液体量并不能预先设定,所以,操作准确性往往较差,因此,移液管更适用于精确度要求不高的大体积液体操作,属于常量移液器。

环凯移液管

0细胞冻存管(无菌)

英文名称:ultra-low temperature preservation tube,用于细胞的低温运输和储存的容器。常规的冻存管规格1.5ml、1.8ml、2.0ml、5.0ml,根据样本量及类型,还可以选择冻存袋等。冻存管根据盖子的设计,分为外旋冻存管和内旋冻存管。


为了样本库更严格的质控管理,有些厂家生产了印有二维码的2D冻存管。无论是哪种冻存容器,必须要做到无DNA酶,无RNA酶,无热原,无毒素认证,无菌级别达10-6,材质无生物污染融出物质等要求。

0一次性细胞刮刀/铲刀

英文名称:Cell scraper,通常采用优质的聚乙烯材料加工成型,具有比较好的韧性,保证在收集细胞过程中保护细胞,收集细胞的辅助工具。

0除菌过滤器(无菌)

用于制备培养基或者与细胞接触的相关试剂,孔径通常为0.22μm或0.1μm。根据待过滤样品的体积,可以选择不同的过滤器材,比如针头滤器、顶式滤器等。

0吸头(无菌)

最常用的一次性的消耗品,用于任何分子生物学和基因学研究的应用,其在移液器和样品之间有效的形成保护结构,保证吸样和分样的安全性。容量范围通常从0.1 — 5000ml。用于细胞实验的吸头,必须要做到无DNA酶,无RNA酶,无热原,无毒素认证,材质无生物污染融出物质等要求。

环凯无菌吸头

0其他耗材

细胞筛网、冻存盒(用于收纳和管理冻存管)、酒精灯、手套、无菌实验服、消毒水、液体储存瓶(用于储存各种配制好的培养液、血清等液体,常用规格有 500 ml、250 ml、100 ml 等)。细胞培养、冻存、操作耗材的正确与细胞生长状况的好坏密切相关,所以我们在选用细胞培养的耗材时,首要条件是无菌,尤其是培养和涉及低温操作的耗材时,还要考虑其低温耐受性以及安全性等。

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