肠道中空肠弯曲菌的一种新型检测方法
发布时间：2024-08-27 浏览次数：142
当你肚子不舒服时，可能会想着忍一会就过去了，如果忍不住了再去医院看看。可你是否想过到底是什么原因、什么菌类、什么病毒引起的呢？本文就是在阐述一种肠道中人类腹泻最常见的病原菌之一—空肠弯曲菌的一种新型检测方法。
首先我们来介绍一下空肠弯曲菌，它的英文名为Campylobacter jejuni，菌体轻度弯曲似逗点状，长1.5～5μm，宽0.2～0.8μm。菌体的一端或两端有单鞭毛，运动活泼，在暗视野镜下观察似飞蝇，无荚膜，不形成芽胞，微需氧菌，在含2.5%-5%氧气或10%二氧化碳的环境中生长最好。最适生长温度37℃-42℃。空肠弯曲菌的抵抗力不强，易被干燥、直射日光及弱消毒剂所杀灭，对低温敏感，室温下(20℃-23℃)很快死亡，该菌有内毒素能侵袭小肠和大肠黏膜引起急性肠炎，也可引起腹泻的暴发流行或集体食物中毒。同时，空肠弯曲菌对红霉素、新霉素、庆大霉素、四环素、氯霉素、卡那霉素等抗生素敏感。近年发现了不少耐药菌株，及多重耐药性菌株。由于空肠衣原体生长缓慢，传统的培养检测技术既费时又费力。此外，主要问题是假阴性结果和基于培养的方法的灵敏度不足。目前，基于核酸的分子技术，如PCR和qPCR(实时定量PCR)，用于检测食源性病原体。然而，对复杂而昂贵的仪器的需求以及模板DNA的纯度使它们无法广泛用于常规检测。
环介导的等温扩增(LAMP)是一种创新技术，利用BstDNA聚合酶的自循环链置换行为，在等温条件下扩增核酸，LAMP可以在任何加热块或恒温干浴中轻松运行。其过程为：首先提取基因组DNA，然后进行灯底漆设计与灯测定，随着进行聚合酶链式反应，最后进行LAMP的测定。结果显示LAMP可生产的DNA量比PCR高一倍，对抑制剂的敏感性相对较低。因此，LAMP可以成为检测和鉴定食源性细菌病原体的快速而简单的工具。
综上所述，开发了一种灵敏、特异、快速、实用的空肠衣原体检测LAMP方法，LAMP测定的另一个重要优点是，可以根据白色沉淀物直接用肉眼判断结果，从而提供与凝胶电泳数据一致的结果。总体而言，用于检测空肠衣原体的LAMP技术在临床、现场和资源匮乏的环境中是一种有价值的工具。
参考文献：Ying Liu , Meidi Xu, Jiang Wang, Yang Cao , Tao Wang , Lan Mu , Chao Niu.Detection of Campylobacter jejuni Based on a Real-Time Fluorescence Loop-Mediated Isothermal Amplification Method，2022.8
来源：微生物安全与健康网，作者~王康
链接：https://www.mbiosh.com/column/testing-technology/testing-technology-method/723
