一种新的用于快速病毒定量的转基因Sf9细胞系
发布时间：2024-11-18 浏览次数：149
在医药行业中，昆虫细胞系经常用于生产重组蛋白，其生产过程需要对重组昆虫病毒进行遗传工程操作。重组病毒可以根据病毒量化过程用于实验中。然而，目前的病毒定量方法受技术和经验要求，持续时间长且复杂。Kyu-Seek Kim等人为解决这一问题，设计了一种可用于快速和便捷地量化昆虫病毒的新型转基因Sf9细胞系。
Sf9-QE细胞系
Sf9-QE细胞系通过引入荧光基因，能够在病毒感染后迅速发出高荧光，从而简化了病毒量化过程。与传统的昆虫细胞系相比，使用Sf9-QE细胞系可以将病毒量化的时间缩短4至6天。该细胞系的平均直径约为16微米，比普通Sf9细胞小2微米，但其增殖速率却是普通Sf9细胞的1.6倍。研究还发现，Sf9-QE细胞系在至少100次传代后仍能保持其特性，表明其稳定性相对较高。此外，荧光光度法也方便了病毒感染的定量。
Kyu-Seek Kim等人在文章中还详细描述了Sf9-QE细胞系的构建过程，包括使用piggyBac系统将目标基因片段转化到Sf9细胞基因组中，以及通过抗生素筛选和多次传代来选择表达EGFP（增强型绿色荧光蛋白）的转基因细胞系。此外，研究还评估了Sf9-QE细胞系在病毒感染后的荧光强度，并与其他细胞系进行了比较。
图1 不同Sf9细胞株对病毒感染的荧光表达水平比较
如图1所示，比较了20株Sf9-T细胞株对病毒感染的荧光表达水平。结果显示，在所有Sf9-T细胞系中，包括作为对照的Sf9-ET，在每过3天就能观察到清晰的荧光表达。值得注意的是，Sf9-T-20细胞在每过1天就能观察到荧光表达，并在4天达到最大值，此时荧光强度大约是Sf9-ET细胞的5倍。因此，选择荧光最快速、最强烈的Sf9-T-20细胞系作为最终的转基因细胞系，命名为Sf9-QE（“QE”代表quick and easy）。
关键发现：
— 使用piggyBac系统将目标基因片段转化到Sf9细胞基因组；
— 通过抗生素筛选和多次传代来选择表达EGFP（增强型绿色荧光蛋白）的转基因细胞系；
— 通过引入荧光基因，能够在病毒感染后迅速发出高荧光，从而简化病毒定量过程。
结论：总的来说，Sf9-QE细胞系的开发为医学和制药行业中重组蛋白的生产和研究提供了一个有用的工具，有望显著提高病毒量化的效率和准确性，从而对人类健康和医疗保健做出贡献。
引用文献：Kyu-Seek Kim, Jun-Su Bae, Hyuk-Jin Moon, Do-Young Kim, Soo-Dong Woo. A Novel Transgenic Sf9 Cell Line for Quick and Easy Virus Quantification[J].Insects,2024,Vol.15(9): 686
来源：微生物安全与健康网，作者~梁冬雪。
