大肠杆菌，总大肠菌群和粪大肠菌群的酶底物法测定原理图
发布时间：2025-12-18 浏览次数：130
参考标准：水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法 HJ 1001-2018
1.总大肠菌群系指一群在 37°C培养 24 小时能发酵乳酸、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌；该菌群主要来源于人畜粪便，具有指标菌的一般特征。故以此作为粪便污染指标评价饮水的卫生质量。
2.粪大肠菌群：是在胰蛋白胨肉汤中于 44.5℃，24h 内产生吲哚的耐热大肠菌群，因检测方法比大肠杆菌简单地多，而受到重视；用提高培养温度的方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中的大肠菌群区分开，在 44.5℃仍能生长的大肠菌群，称为粪大肠菌群。是水体受人畜粪便污染的比较直接指标。
3.大肠杆菌：细菌门细胞，杆状，直径约 1 微米，长约 2 微米，两端钝圆，周身具鞭毛，可运动.革兰氏染色阴性，不形成芽孢.菌落圆形，白色或黄白色，光滑而具闪光，低平或微凸起，边缘整齐。
最适条件下培养20 分钟可繁殖1 代。
大肠杆菌是人和温血动物肠道内普遍存在的细菌，是粪便中的主要菌种。一般生活在人大肠中并不致病，可能在肠中对合成维生素 K 起作用。但它侵入人体一些部位时，可引起感染，如腹膜炎、胆囊炎、膀胱炎及腹泻等。人在感染大肠杆菌后的症状为胃痛、呕吐、腹泻和发热。感染可能是致命性的，尤其是对孩子及老人。
大肠杆菌的检验是以无菌操作取 25g 样品，放入装有 225mL 稀释剂的灭菌均质杯内，于8000 r/min 均质1～2min，制成 1:10 样品匀液(也可用灭菌乳钵研磨的方法代替)。
稀释样品匀液根据对样品污染情况的估计，用稀释剂将样品匀液制成一系列十倍递增的样品稀释液，从制备样品匀液至稀释完毕，全过程不得超过15minLST 和 EC 初步筛选：对每个样品选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液。每个稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白(月示)(LST)肉汤，每管接种 1mL。将接种管置于 36±1 ℃培养48±2h ；观察试管的产气情况：检查倒管内是否有气泡产生，用直径为 3mm 的接种环将所有48±2h 内产气的 LST肉汤管培养物移种于 EC 肉汤管中；将所有接种的 EC肉汤管在 30min 内放入带盖 44.5±0.5 ℃水浴箱内培养 48±2h 。
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