中国工程院食品安全院士团队

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　　为了提高微生物检验结果的准确性和可靠性,必须建立一套行之有效的质量控制体系,关键控制点如下：

1.实验室的建设和维护

　　微生物实验室主要分为无菌实验室、净化实验室、生物安全实验室等，净化实验室应采用封闭过滤除菌通风形式,吊顶、隔墙、围护全部采用彩钢板，地面作环氧树脂自流平处理，并设置非净化区、更衣区、净化区.净化实验室应定期进行风速监测和及时更换过滤层罩，条件有限的实验室可使用超净工作台;无菌室应配紫外线消毒装置, 在使用前后都应用紫外线灯照射消毒，并定期进行紫外线强度和空气质量监测;生物安全实验室除了正常管理、维护之外,要注意空气过滤的质量和工作人员的隔离防护。

2.人员

　　保证实验结果的质量，首先应重视检验人员的科学技术素质，为技术人员及时了解当今的科技进步信息和掌握先进的实验技术创造条件。卫生检验人员应具有较强的专业知识和技能，应经常参加培训交流，以丰富积累工作经验，提高卫生检验的水平。而作为卫生检验人员应具有自我监督和自我检查的质量控制指导思想。在人员的继续教育方面，微检人员须受过细菌学检验的专门基础教育，并以细菌检验为专业，具有严谨的科学工作态度,及时了解和掌握卫生检验领域新的进展和动态,并须按照国家卫生检验标准来进行操作.

3.培养基、试剂的配置及保存

　　培养基、试剂的购买，应要求供货商出具“三证”.培养基和试剂使用前首先通过外观、批号、PH值、选择性等进行初步评估, 应检查培养基和试剂是否合格,是否在保质期内.培养基和试剂的配制应有记录可查，培养基应按照要求选择合适的压力和时间进行灭菌，并且应有高压灭菌效果的监测记录。配制的培养基和试剂应进行无菌试验，并有无菌试验记录.并根据检验微生物指标不同,应选择不同的培养基和试剂.基础培养基不仅要求细菌能生长,还必须发育良好，并能使细菌充分表现出其典型特征;选择性培养基按不同细菌的生长条件要求而选择不同的培养基.此外还要选择不同的阳性对照菌株做质控,以检验培养基的质量，如细菌生长、抑制、溶血特征;典型菌落形态、色素等质量情况.配制和倾注培养基时,应注意控制培养基的PH值,因为PH值对细菌的生长影响较大。制好的培养基还应进行无菌试验,即35℃孵育过夜,看是否有菌生长。不同培养基应按不同培养要求,接种相应菌种,按细菌的生长抑制、形态、色素、溶血环等特征,判断培养基的质量。培养基和试剂的贮存应按照其说明的贮存条件来保存,不同批号的培养基和试剂不能混合使用。微生物实验室应配备微检所需的所有试剂、诊断血清和标准菌株，试剂和诊断血清应注意其有效期,并定期用标准菌株监测其敏感性和特异性，而标准菌株应注意妥善保存,专人保管,并做好菌种领取使用和销毁的登记制度。各种细菌鉴定用生化培养基,在有效期,应用标准菌株进行质量检验。试剂如氧化酶、触酶试剂,每天用前须以阳性菌株测试，革兰氏染色液可用金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌作为质控菌。

4.仪器设备

　　细菌实验室使用的仪器设备主要有冰箱、培养箱、高压灭菌器、净化台等.对于连续工作的仪器如冰箱、培养箱，每天都要对其进行温度监控和记录并定期维护。高压灭菌器应对其压力表定期进行检定,在进行物品灭菌时,应做高压灭菌效果监测,并且有监测记录.净化台应定期检测风速, 要求至少每半年监测一次风速，若低于0.36-0.54m/s，则应更换工作台上方的高效过滤流罩.。对于需要溯源的器具如温度计，应定期进行自校准和检定,因为控制温度在整个细菌实验中很重要的。

5.积极参加室间质量评价活动

　　质评是质量保证体系的重要组成部分。质量评价是对实验室作水平和能力的综合判断,也是对实验室内质量控制效果的检验。因此,除了做好室内质控的同时，应尽可能参加范围更广泛的室间质评活动，以提高卫生检验人员的检验水平和检验结果的准确性。

6.建立一套完整的质量保证体系

　　样品的管理：样品应正确采样，并有充分的代表性，严格按照无菌操作要求采样，且送检样品的标识应是唯一性，同时要做好样品的交接登记保存及处置等工作。送检样品尽快检验，避免样品保存时污染、腐败变质，影响检验结果准确性。

　　检验方法：微生物检验应按国家卫生检验标准方法或其它实验室认可方法进行。

　　检验过程：检验过程中应严格执行无菌操作规程，每个样本要做空白对照和平行样,以保证微生物检验结果的准确性和可比性。

　　报告制度：每张报告应有检验者、审核者、签发者的签名,并附有检验原始记录,以尽量避免错误的检验报告,保证结果的可靠性和可溯源性。

　　完善实验室管理：建立实验室内审制度，及时更新程序文件,以不断提高卫生检验管理水平,完善实验室质量体系。

7.实验室的环境

　　实验室的环境应满足检测要求，不能影响检测结果的可靠性、有效性和准确性,试剂和样品保存室,其温度湿度应每天进行监控并有记录。与微生物检验室相邻区域如有互不相容的活动时，应进行有效的隔离，并采取措施防止交叉污染。