产品名称:One-Step RT-PCR Kit
中文名称:一步法 RT-PCR 试剂盒(一步法逆转录-聚合酶链反应试剂盒)
产品编号与包装规格:
编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 产品价格 |
HKE045-01A | One-Step RT-PCR Kit | 200次 | 一步法 RT-PCR 试剂盒 (一步法逆转录-聚合酶链反应试剂盒 | 英文全称:One-step reverse transcription-polymerase chain reaction kit) | 1695 |
产品描述:One-Step RT-PCR Kit 一步法 RT-PCR 试剂盒是基于本公司Reverse Transcriptase 反转录酶(Cat.No: HKE123)和 HotStart Taq DNA 聚合酶(Cat.No: HKE017),对缓冲液体系进行优化使 反转录酶和聚合酶同时发挥最大功效,具有方便、快速、灵敏度高、重 复性好等特点。该试剂盒能以动物、植物和微生物的总 RNA 或 mRNA 为模板,cDNA 合成和 PCR 反应在一个管中进行,反转录结束后可直接进行 PCR 循环而不用增加额外的步骤;同时可对低至 1fg 的总 RNA 进行扩增,有助于大量样品的处理并减少污染机会。
产品特点:
效率高,可反转录 GC 含量 ,二级结构复杂的 RNA 模板。
独特的缓冲体系使反转录酶和聚合酶同时发挥最大功效。
操作简单,可最大限度的避免污染。
注意事项:
1)本试剂盒 PCR 扩增延伸时间为 1kb/min,客户可根据具体片段长度进行延伸时间的调整。
2)通常情况,28~30 个循环可达到最佳扩增,对于低拷贝目的基因的检测,可将循环数增加到 40 个。
3)如果同时操作多个样品,建议先在冰上先配制预混液,然后再分装到各个反应管中,加入模板启动反应。
4)反应出现目标条带拖带,系模板浓度过高或特异引物浓度不适等原因所致,可对模板及引物浓度等进行调整;反应出现杂带,可对退火温度进行调整,或重新设计特异性高的引物。
5)本试剂盒只需使用特异性反转录引物,无需使用 Random Primer 和 Oligo dT Primer 等进行反转录反应。
6)为了保证反应的正常进行,需使用高质量的 RNA 模板。
保存温度:-20℃。
产品包装(A包装):
操作方法:
1)将 RNA 模板、引物 、 2×One-Step RT-PCRSuperMix,RT Enzyme Mix 和 RNase Free Water 溶解并置于冰上备用。
2) 配制以下反应体系:
3)轻轻混匀后短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
4)设置反应程序: