产品名称:Reverse Transcriptase
中文名称:逆转录酶(反转录酶)
产品编号与包装规格:
编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 产品价格 |
HKE123-01A | Reverse Transcriptase | 10000U | 逆转录酶(反转录酶) | 645 |
产品描述:本制品是通过基因重组技术克隆表达M-MuLV的缺失突变型 RNase H-的反转录酶。一般的野生型M-MuLV(Moloney Murine Leukemia Virus)具有以下几种活性:依赖于RNA的DNA聚合酶活 性;依赖于DNA的DNA聚合酶活性;RNase H活性。由于RNaseH 能够催化降解 DNA/RNA杂合体中的RNA,因此在cDNA第一条链 的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶的 RNase H活性缺失,延伸能力强,可用于较长的cDNA合成,高比 例的全长cDNA文库的构建以及Real Time RT-PCR反应等。
反转录酶 产品用途:
1) 1st Strand cDNA的合成;
2) cDNA Probe的制备;
3) RT-PCR反应以及Real Time RT-PCR反应。
保存温度:-20℃。
产品反应 Buffer 中含有高浓度的 DTT,低温下或者冻融可 能会导致沉淀析出,请恢复至室温并轻摇混匀后使用。
Reverse Transcriptase 产品包装(A包装):
反转录酶 质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE 胶检测仅可见清晰单一 目的条带,PCR 方法检测无大肠杆菌 DNA 残留,无核 酸内、外切酶污染,无 RNA 酶污染。
反转录酶 活性定义:以Poly(rA)•Oligo(dT)为模板/引物,在37℃、10 分钟条件下,掺入1 nmol的[3H] dTTP所需要的酶量定 义为1个活性单位。
逆转录酶 操作方法与常用PCR循环:
使用Reverse Transcriptase 注意事项:
1) 用DEPC处理实验用到的所有实验器材,或者 购买已经证明无核酸酶的实验用具,实验过程戴手套 并经常更换手套,避免RNA酶的污染。
2) 确保所用试剂及超纯水中无RNA酶污染。
3) 纯化过的RNA必须保证不含有盐,金属离子, 乙醇和苯酚,以上成分会干扰第一链cDNA的合成反 应。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。
4) 为保证反转录反应的有效进行,需使用高质量 的RNA模板。