产品名称：水质（粪）大肠菌群检验纸片
产品编号与包装规格：
| 产品编号 | 产品类型 | 包装规格 |
|---|---|---|
| 060030 | 纸片 | 10 份/盒（10mL 水样量纸片 5 袋，1mL 水样量纸片 10 袋） |
| 060070 | 纸片 | 10 份/盒（1mL 水样量纸片 15 袋） |
产品用途：广泛应用于生活饮用水、饮用天然矿泉水的水源水、地表水和废水中总大肠菌群和粪大肠菌群的检测。
检验原理：按 MPN法，将一定量的乳糖、指示剂（溴甲酚紫和 2,3, 5-氯化三苯基四氮唑即 TTC）以及营养成分等吸附于一定面积的无菌滤纸上，在特定的温度（37℃ 或 44.5℃）培养24h，当细菌生长繁殖时，产酸使 PH值降低，溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色。同时，产气过程相应的脱氢酶在适宜的 PH值范围内，催化底物脱氢还原 TTC 形成红色的不溶性三苯甲臜（TTF），即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点（或红晕）。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断，从而确定是否有总大肠菌群或粪大肠菌群存在，再通过查 MPN表 就可得出相应总大肠菌群或粪大肠菌群的浓度值。
水质（粪）大肠菌群检验纸片使用方法：
1、接 种：每个样品按三个10倍递减的不同接种量接种，每个接种量分别接种5袋纸片，共接种15袋纸片。
清洁水样（选用产品编号为 060030 的纸片），接种水样总量为55.5mL, 10mL水样量纸片5袋，每袋接种水样10mL，1mL水样量纸片10张，其中5张各接种水样1mL，另5袋各接种 1：10的稀释水样1mL。
受污染水样（选用产品编号为 060070 的纸片），接种3个不同稀释度的1mL稀释水样各5袋。接种水样应均匀滴加在纸片上，纸片充分浸润、吸收水样，然后用手在塑膜袋外侧轻轻抚平，做好标记，袋口朝上竖直放置于恒温培养箱培养。
2、培养：检测总大肠菌群时，在36℃-38℃条件下培养18~24h后观察结果；检测粪大肠菌群时，在44.5±0.5℃的条件下培养18~24h 后观察结果
3、结果判读：
（1）纸片上出现红斑或红晕且周围变黄，为阳性。
（2）纸片全片变黄，无红斑或红晕，为阳性。
（3）纸片部分变黄，无红斑或红晕，为阴性。
（4）纸片的紫色背景上出现红斑或红晕，而周围不变黄，为阴性。
（5）纸片无变化，为阴性。
4、结果报告：根据不同接种量的阳性纸片数量，查相应的 MPN 表（见 HJ 755-2015 附录 B），按公式（1）换算并报告 1L水样中总大肠菌群或粪大肠菌群数：
公式（1）：C=100×M/Q
C-水样总大肠菌群或粪大肠菌群浓度（MPN/L）
M-查 MPN 表得到的 MPN 值（MPN/100mL）
Q-实际水样最大接种量（mL）
100-为 10×10mL，其中，10 将 MPN 值的单位 MPN/100mL 转换为 MPN/L，10mL 为 MPN 表中最大接种量。
5、结果表示：测定结果保留二位有效数字，大于等于 100 时以科学计数法表示，结果的单位为 MPN/L。平均值以几何平均计算。
水质（粪）大肠菌群检验纸片质量控制：
1，理化指标：加水后，纸片 pH 值 7.0-7.3。
2，本品接种下列菌株，置于温箱中培养 18-24h，结果如下：
| 指标 | 质控菌株及编号 | 培养温度 | 特征性反应 |
|---|---|---|---|
| 生长率 | 大肠埃希氏菌ATCC25922 | 36～38℃ | 纸片变黄，并在黄色背景上呈现红点或片状红晕。 |
| 金黄色葡萄球菌ATCC6538 | 纸片保持紫色不变 | ||
| 大肠埃希氏菌ATCC25922 | 44.5±0.5℃ | 纸片变黄，并在黄色背景上呈现红点或片状红晕。 | |
| 产气肠杆菌ATCC13048 | 纸片保持紫色不变 |
储存条件与保质期：2-8℃避光贮存，并注意防潮，保质期一年，如发现纸片变为粉红色即为失败。
注意事项：
1、水样采集后 2h 内检测，否则，需 10℃以下冷藏并 6h 内送检，实验室接样后，应将样品放入 0-4℃冰箱并 2h 内测定。
2、为避免纸片加入水样后，短时间内变黄或退色，如果采集水样含有余氯或经过加氯处理，需在采样瓶灭菌前加入硫代硫酸钠（0.1g/mL）0.2mL （10mg 硫代硫酸钠可保证去除水样中 1.5mg 余氯，硫代硫酸钠用量克根据水样实际余氯量调整）；如果采集水样重金属含量较高，需在采样瓶灭菌前加入乙二胺四乙酸二钠（EDTA- Na2）溶液（0.15g/mL）0.6mL，以消除干扰。酸性样品，需在分析前按无菌操作要求调节样品的 pH 值至 7.0-8.0。
3、检测粪大肠菌群时，纸片接种后应立即放置于 44.5±0.5℃的恒温培养箱中培养，在常温下放置过久将影响检测结果的准确性。
4、质检报告可以登录环凯网站 http://www.huankai.com， 打开“质检报告”页面，输入产品批号下载。
废物处理：检测之后带菌物品置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。
执行标准：Q/HK 0706-广东环凯微生物科技有限公司企业标准 微生物检验卡
水质（粪）大肠菌群检验纸片参考文献：
1，《水和废水监测分析方法（第四版）》
2，GB/T 5750.12-2006 中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验法
3，GB 8538-2016 中华人民共和国国家标准 饮用天然矿泉水检验方法
4，HJ 755-2015 水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定 纸片快速法
