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细菌新型生化鉴定管使用说明
―― 071940 铜绿假单胞菌生化鉴定盒(5种×10次)
一)生化管的使用方法
开启西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开铝盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞(如图1)所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
二)铜绿假单胞菌生化鉴定盒的详细使用方法
铜绿假单胞菌为革兰氏阴性杆菌,专性需氧,氧化酶阳性,在42℃条件下生长的一类致病菌。
将待测菌的纯培养物接种于每种微量西林瓶内,接种方式、培养时间或培养方式,请详见表1各项生化管使用说明。
表1各项生化管使用说明 | ||||
产品名称 | 结果判定 | 培养时间 (小时) | 使用说明 | |
阳性 | 阴性 | |||
绿脓色素 | 产生色素 | 不产生色素 | 22~26 | 西林瓶半加塞(如图2右两瓶所示)培养后加入氯仿约15~20滴,充分振荡,阳性者氯仿提取液呈蓝色,再加入1mol/L盐酸6~10滴,振荡后静置片刻,如上层盐酸液呈粉红色或紫红色即为阳性,表示有绿脓色素存在。 |
乙酰胺肉汤 (产氨试验) | 产生红褐色沉淀 | 淡黄色或不变色 | 20~24 | 挑取新鲜菌苔接种到乙酰胺液体培养基中半加塞培养后加入1-2滴钠氏试剂,10s内观察颜色变化,如表现出从黄色到红褐色的颜色变化,则为阳性。 |
金氏B琼脂 (荧光试验) | 产荧光 | 不产荧光 | 1d~5d | 用接种针挑取新鲜菌苔,在斜面上划“之”字形接种。半加塞培养后,在紫外灯365nm下检查其是否产生荧光。 |
营养琼脂 (42℃生长) | 生长 | 不生长 | 42±1℃,24~48 | 用接种针挑取新鲜菌苔,在斜面上划“之”字形接种,半加塞培养。 |
氧化酶试剂 | 蓝紫色 | 不变色 | 30秒内 | 滴加1滴试剂到一小块洁净滤纸上,以刚刚浸湿为宜;用玻棒或接种环(铂或塑料)挑取适量新鲜菌苔涂在纸片上。 |
备注:本鉴定盒是按照环凯产品目录中的品种成份从左到右的顺序摆放。 |
三)铜绿假单胞菌的生化鉴定程序(见下图)和生化鉴定特征(见表2)