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细菌新型生化鉴定管使用说明
―― 071910 嗜肺军团菌生化鉴定盒(7种×10次)
一)整套试剂及用品
鉴定生化反应的7种培养基各10瓶(表1)、配套试剂(茚三酮试剂、硝酸盐还原试剂甲、乙液)各1瓶,无菌生理盐水10瓶、0.5 McFarland的浊度管1支、一次性吸管10支、使用说明书一份。
二)生化管的使用方法
开启西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开铝盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞(如图1)。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
三)军团菌生化鉴定盒的详细使用方法
挑取待检菌落进行革兰氏染色镜检,军团菌为革兰氏阴性杆菌。将新鲜菌苔接种于普通肉汤中37℃培养18-24h或用0.85%无菌生理盐水稀释至0.5 McFa-rland(约108cfu/mL), 各吸取0.05-0.08mL(约1~2滴)的肉汤培养物或菌悬液加入每种微量西林瓶内。(一般生化按此操作,有特殊要求的见表1)将接种后的西林瓶再套上胶塞,一般采用全加塞(如图2左两瓶所示),特殊情况在下表注明采用半加塞(如图2右两瓶所示),直立于内托的凹槽内(如图2),或放置于合适的瓶架中,于35-37℃培养箱中培养,结果观察见下表1。注意:如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式,详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
表1 | ||||
产品名称 | 结果判定 | 培养时间 (小时) | 使用说明 | |
阳性 | 阴性 | |||
葡萄糖(军团菌) | 黄色 | 紫色 | 18-24 | 接种培养后观察颜色变化 |
乳糖(军团菌) | 黄色 | 紫色 | 18-24 | 同上 |
麦芽糖(军团菌) | 黄色 | 紫色 | 18-24 | 同上 |
硝酸盐(还原)(军团菌) | 深红色 | 无色或者略带淡粉红色 | 18—24 | 接种培养后加硝酸盐还原试剂甲、乙液各2滴,混匀,立即观察结果。 |
尿素(军团菌) | 桃红色 | 淡橙红色(不变色)或黄色 | 12-24 | 打开西林瓶胶塞后,向西林瓶中加入所配备的1.5mL/瓶的无菌水,充分溶解。再用接种针挑取新鲜菌苔直接接种于西林瓶内。接种后,置于35-37℃培养箱中培养12-24h,观察结果。 |
明胶(军团菌) | 4℃液态 | 4℃固态 | 48—72 | 用接种针挑取新鲜菌苔穿刺接种,37℃培养后置4℃冰箱10分钟后观察结果。 |
马尿酸(军团菌) | 紫色 | 黄色 | 4 | 用接种环挑取3-4环菌苔接种后,35-37℃培养箱中培养4h或者35-37℃水浴2h,加茚三酮试剂0.2mL,在35-37℃水浴锅或者培养箱10min。如果仍不变色,可用未滴加试剂的培养液继续培养至24h再加茚三酮试剂,观察结果。 |
四)嗜肺军团菌的生化鉴定特征(只供参考)
类(葡萄糖、乳糖、麦芽糖)发酵阴性(—),硝酸盐还原阴性(—),尿素酶阴性(—),明胶液化阳性(+),水解马尿酸(+)。