离心机的工作原理、离心力的换算以及离心转子的选择
发布时间:2026-02-26 浏览次数:124
一、离心机的工作原理
离心机样本进行沉降分离的物理学基础是通过离心力对样本的作用。当将装有样本的离心管放入离心机中,离心机开始工作,样本做匀速圆周运动,于是产生一个向外的离心力。旋转的半径越大,旋转的速度越快,离心力越大,颗粒沉降越快。由于不同颗粒的质量、密度、大小、形状各不相同,在同一固定的离心场中沉降速度不同。
二、离心力和相对离心力
1.离心力
F=mw2r(其中F为离心力强度,m为沉降颗粒的有效质量,W为离心转子转动的角速度,单位为rad/s,r为离心半径cm,即离心机轴中央到水平离心机试管底部的距离,或者垂直式离心机试管口中央的距离)
2.相对离心力RCF(Relative Centrifugal Force)
离心力通常用相对离心力RCF表示,即离心力F的大小相对应地球引力的多少倍,单位为g。RCF是一个只与离心机相关的参数,与样本无直接的关系。
相对离心力(RCF)是衡量离心效果的真正标准,因为它直接反映了样品所承受的离心力大小,从而决定了颗粒分离的效率和速度。无论离心机的转子大小、型号如何,只要RCF值相同,样品所受到的离心力就是相同的。这使得不同实验室、不同型号离心机之间的实验条件具有可比性。
三、转速RPM
RPM,全称Revolutions Per Minute,意为“每分钟转数”。它是一个描述离心机转子纯粹旋转速度的单位,表示转子在单位时间内(一分钟)旋转了多少圈。例如,当一台离心机显示其转速为10,000 RPM时,意味着其转子每分钟旋转一万圈。
它仅描述机器转子转动的快慢。该参数仅反映转子的转动频率。
四、RPM与RCF换算
RCF和RPM之间的转换公式如下:
RCF = 1.118 × 10^(-5) × r × (RPM)^2
或:
g = (RPM / 1000)^2 × r × 11.18
公式中各项的含义与单位:
RCF (g):相对离心力,单位为“g”(地球重力加速度的倍数)。
r:离心半径,单位为“厘米(cm)”。这是指从转子轴心到离心管底部(或样品中心)的有效旋转半径。
RPM:每分钟转数,单位为“转/分钟”。
1.118 × 10^(-5):这是一个常数,用于平衡单位并使结果以“g”表示。
五、离心转子的选择
转子是离心机的有机组成部分,可分为水平转子、角转子,每个转子各有应用范围。
1.水平转子
水平转子的吊篮可以90°的角度水平摆出,让样品沉淀直接位于管底部的中间。这些转子的优势在于,可提供不同的适配器选择,能够实现大容量和高灵活性。

样品分离效果:

样品沉淀位于管底中部,而不是像固定角转一样将样品沉淀于管壁侧面,好处就是:当待分离样品的浓度较低时,只要让样品尽可能密集沉淀于管底,然后使用小体积的缓冲液来重悬沉淀,就能让样品浓度尽可能高。另外,梯度离心也需要使用水平转子,这样才能形成多个水平梯度层,同时保证在离心结束也能保持各个水平梯度的位置。
需要使用水平转子的场景:
① 样品通量较高;
② 需进行梯度离心;
③ 需要把样品离心至管底中间;
2.角转子
(1)固定角转子
固定角转就是样品管在固定的角度下完成离心,样品通常沉淀在管壁。固定角转没有像水平转子那样可移动的部件,转子承受的金属压力较小,因此,固定角转可以实现更高的相对离心力和由此而缩短的离心时间(Eppendorf 5430 R 相对离心力最高可达30,000 x g)。缺点是离心通量有限(Eppendorf台式离心机最大离心通量6x250 mL, 落地高速离心机最大离心通量 6 x 1L)。

样品分离效果
大多数固定角度的转子孔在45°角度时可以形成最紧密的样品沉淀。小于45°的固定角度转子则可导致样品沉淀区域更分散,在转移上清时可能产生沉淀的再次重悬,影响分离效果。

需要使用固定角转子的场景:
① 需要更大的相对离心力才能彻底分离;
② 需要更紧凑的颗粒;
③ 样品体积较少;
(2)垂直角转子
离心管垂直放置,离心力方向与管轴平行,样品沿离心管长度方向快速沉降,沉降路径为三类转子中最短。优点:分离速度最快,且能减少样品扩散,显著提升分离精细度,适配严苛的超速离心实验需求。

需要使用垂直角转的场景:
主要用于超速离心机,可实现亚细胞组分(如线粒体、叶绿体)分离、密度梯度离心的快速制备等精细实验,是科研领域精准分离的关键部件。
关于转子选择总结:

六、不同转子的FCF值(g值)、rpm值、r值的关系
可以从以下2个图中读出:

高速转子的相对离心力列线图
要确定某一列上的未知值时,用尺子排列其他两列的已知值,所需落在尺子与第三列的交切处。如:转子速度80000rpm,旋转半径20mm时,相对离心力FCF值约为150000g。

低速转子的相对离心力列线图
要确定某一列上的未知值时,用尺子排列其他两列的已知值,所需落在尺子与第三列的交切处。如:转子速度5000rpm,旋转半径40mm时,相对离心力FCF值约为1100g。
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