071748 沙门氏菌生化鉴定盒(10种×10次)(SN标准)
一)整套试剂及用品
鉴定生化反应的10种试剂(表1)、10瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、10支一次性吸管。
二)生化管的使用方法
开启西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开铝盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞(如图1)。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
注意:氰化钾生化管,应尽量将胶塞套紧,以免氰化钾挥发造成假阳性!。(如果发现氰化钾生化鉴定管的颜色由浅黄色变为深褐色
或黑色即为变质,不能继续使用)
三)沙门氏菌生化鉴定盒的详细使用方法
沙门氏菌为需氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌,有动力,有周鞭毛(但有无动力的变种),最适温度为37℃,最适pH为7.2~7.6,
在固体培养基上37℃ 24h~48h菌落可呈中等大小,光滑,圆形,湿润,隆起,在液体培养基内生长均匀浑浊。
挑取平板分离的可疑菌落直接进行三糖铁琼脂和营养琼脂培养,将可疑菌落置于已配备的无菌生理盐水中,与0.5 McFarland的浊度管比浊,将菌悬液制备成0.5McFarland ( 约108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(约0.06mL)菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞,一般采用全加塞(如图2左两瓶所示),特殊情况在下表注明采用半加塞(如图2右两瓶所示),直立于内托的凹槽内(如图2),或放置于合适的瓶架中,于35-37℃培养箱中培养,结果观察见表1。
注意:如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式,请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
四)沙门氏菌生化鉴定特征
自选择性琼脂平板上直接挑取至少2个典型或可疑菌落,分别用接种针接种赖氨酸脱羧酶培养基或尿素酶琼脂一管,接种后无须
灭菌接种针,直接再接种三糖铁琼脂一管于37℃培养24±2h。按表2或表3结果进行判断。
将符合表2 或表3 可疑沙门氏菌属特性的三糖铁琼脂培养物,接种于普通肉汤中37℃培养18-24h 或用0.85%无菌生理盐水
稀释至5McFarland (约109cfu/mL), 各吸取0.05-0.08mL(约1~2 滴)的肉汤培养物或菌悬液加入每种微量生化管内。按表4
进行生化试验(表中赖氨酸脱羧酶试验或尿素试验的结果见表2 或表3 的结果,不再另做。)