微生物检测冻干质控菌种非O1霍乱弧菌标准菌株使用说明
1、 复苏非O1霍乱弧菌标准菌株前应准备适于该菌种生长的培养基和培养设备，所有操作均应在符合生物安全保护及无菌条件下进行。
2、 启开非O1霍乱弧菌标准菌株前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在无菌条件下，按铝盖上的箭头方向打开塑盖，撕开铝盖，打开西林瓶胶塞，加入复苏液（购买菌株包装中提供），将非O1霍乱弧菌标准菌株（干粉）制成悬浮液，然后用无菌滴管或移液器吸取适量，移至非选择性固体培养基平板（或液体培养基）上（除特殊情况或特别推荐外），按推荐的培养条件进行培养和传代保存（详见附表“冻干菌种的复苏培养和传代保存”）。
3、 有个别冻干菌种（如弧菌属、乳杆菌属等）复苏速度较慢，可按2操作后，同时将菌悬液置推荐的培养条件培养过夜，再选用适合非O1霍乱弧菌标准菌株生长的选择性培养基进行分离，操作见4。
4 、培养后观察菌种的生长情况，并检查其纯度，如发现纯度不能满足要求时，应选用适合非O1霍乱弧菌标准菌株生长的选择性培养基进行分离，并按推荐的培养条件进行培养，培养后观察目标菌的菌落特征与生化特征，挑取典型菌落做纯培养后再使用。
5、 本品为一次性用品，开启之后不宜反复使用或保存，暂不使用时，建议4℃保藏。
6、 复苏后的菌种一般宜传代（如:斜面传代）2～3次后使用，菌种传代5次后建议弃置。
7 、非O1霍乱弧菌标准菌株购买后应在保质期内使用。
注）：购买后如发现菌种异常或污染等情况，请在购买之日起1个月内与我们联系。
冻干菌种非O1霍乱弧菌标准菌株复苏示意图：
附表 冻干质控菌种标准菌株的复苏培养和传代保存
称 | 复苏液 （包装中提供） | 复苏培养基 | 培养条件 | 保存温度 | 转接 频率 | 备注 |
大肠埃希氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌 | 脑心浸液培养基 | 营养琼脂（022020） | 24h～48h | 2~ | 一个月 |
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阪崎肠杆菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌 | ||||||
肺炎克雷伯氏菌、粘质沙雷伯氏菌 | ||||||
变形杆菌、弗氏柠檬酸杆菌 | ||||||
小肠结肠炎耶尔森氏菌 | ||||||
葡萄球菌、微球菌、马红球菌、芽胞杆菌 | ||||||
假单胞菌、气单胞菌属 | 脑心浸液培养基 | 营养琼脂（022020） | 24h～48h | 一个月 |
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荧光假单胞菌 | 脑心浸液培养基 | 营养琼脂（022020） | 25℃-30℃ 24h～48h | 一个月 |
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肠球菌、链球菌 | 脑心浸液培养基 | 血平板（024070） | 24h～48h | 2~ | 半个月 |
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李斯特氏菌 | 脑心浸液培养基 | 胰蛋白胨大豆酵母浸膏琼脂 (TSA-YE) (026020) | 24h～48h | 2~ | 一个月 |
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梭菌 | 脑心浸液培养基 | 疱肉牛肉粒肉汤（027140）或梭菌増菌肉汤（027145）或哥伦比亚血平板（CP0160） | 48h～72h厌氧培养 | 2~8℃ 厌氧环境 | 半个月 | 接种疱肉牛肉粒肉汤后加无菌液体石蜡（029110）高约1cm。 |
霍乱弧菌、拟态弧菌 | 碱性蛋白胨水 | 碱性琼脂（025040） | 24h～48h | 一个月 |
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其它弧菌(副溶血性弧菌、创伤弧菌、河流弧菌、溶藻弧菌等) | 3％NaCl碱性蛋白胨水 | 3％NaCl 营养琼脂 或3％NaCl TSA （025043） | 24h～48h | 一个月 |
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霉菌、念珠菌、酵母菌 | 沙氏葡萄糖液体培养基 | 马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)(021050) | 2d～5d | 2~ | 两个月 |
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空肠弯曲菌 | 布氏肉汤 | 血平板（024070） 42± | 42± | 2~ 微需氧 | 一周 |
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双歧杆菌 | TPY肉汤 | 双歧杆菌琼脂（027330） | 48h～72h厌氧培养 | 2~ 厌氧环境 | 一周 |
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其它乳酸菌(乳酸杆菌、乳酸杆菌亚种、嗜热乳酸链球菌) | MRS肉汤或脱脂乳溶液 | 灭菌脱脂乳或 MRS琼脂（027315） | 24h～48h | 2~ | 一周 |
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嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属 | 脑心浸液培养基 | 巧克力平板培养基 (普通)(029032) | 48h～72h 5～10%CO2环境 | 2~ 5~10%CO2 环境 | 一周 |
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军团菌 | 脑心浸液培养基 | BCYE平板 (CP0020) | 4d～7d | 2~ | 一个月 | 转接时用一次性接种环，不能使用酒精灯；如使用平板转接，培养时建议用牛皮纸或报纸包好，避免平板失水变干。 |
