微生物检测冻干质控菌种蜡样芽孢杆菌 CMCC(B)63301使用说明
1、 复苏蜡样芽孢杆菌质控菌种前应准备适于该菌种生长的培养基和培养设备,所有操作均应在符合生物安全保护及无菌条件下进行。
2、 启开蜡样芽孢杆菌质控菌种前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开塑盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞,加入复苏液(购买菌株包装中提供),将蜡样芽孢杆菌冻干菌种(干粉)制成悬浮液,然后用无菌滴管或移液器吸取适量,移至非选择性固体培养基平板(或液体培养基)上(除特殊情况或特别推荐外),按推荐的培养条件进行培养和传代保存(详见附表“冻干菌种的复苏培养和传代保存”)。
3、 有个别冻干菌种(如弧菌属、乳杆菌属等)复苏速度较慢,可按2操作后,同时将菌悬液置推荐的培养条件培养过夜,再选用适合该菌种生长的选择性培养基进行分离,操作见4。
4 、培养后观察菌种的生长情况,并检查其纯度,如发现纯度不能满足要求时,应选用适合蜡样芽孢杆菌生长的选择性培养基进行分离,并按推荐的培养条件进行培养,培养后观察目标菌的菌落特征与生化特征,挑取典型菌落做纯培养后再使用。
5、 冻干质控菌种为一次性用品,开启之后不宜反复使用或保存,暂不使用时,建议4℃保藏。
6、 复苏后的菌种一般宜传代(如:斜面传代)2~3次后使用,菌种传代5次后建议弃置。
7 、蜡样芽孢杆菌质控菌种购买后应在保质期内使用。
注):购买后如发现菌种异常或污染等情况,请在购买之日起1个月内与我们联系。
冻干菌种蜡样芽孢杆菌复苏示意图:
附表 冻干质控菌种的复苏培养和传代保存
质控菌种名称 复苏液 (包装中提供) 复苏培养基 培养条件 保存温度 转接 频率 备注 大肠埃希氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌 脑心浸液培养基 营养琼脂(022020) 24h~48h 2~ 一个月 阪崎肠杆菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌 肺炎克雷伯氏菌、粘质沙雷伯氏菌 变形杆菌、弗氏柠檬酸杆菌 小肠结肠炎耶尔森氏菌 葡萄球菌、微球菌、马红球菌、芽胞杆菌 假单胞菌、气单胞菌属 脑心浸液培养基 营养琼脂(022020) 24h~48h 一个月 荧光假单胞菌 脑心浸液培养基 营养琼脂(022020) 25℃-30℃ 24h~48h 一个月 肠球菌、链球菌 脑心浸液培养基 血平板(024070) 24h~48h 2~ 半个月 李斯特氏菌 脑心浸液培养基 胰蛋白胨大豆酵母浸膏琼脂 (TSA-YE) (026020) 24h~48h 2~ 一个月 梭菌 脑心浸液培养基 疱肉牛肉粒肉汤(027140)或梭菌増菌肉汤(027145)或哥伦比亚血平板(CP0160) 48h~72h厌氧培养 2~8℃ 厌氧环境 半个月 接种疱肉牛肉粒肉汤后加无菌液体石蜡(029110)高约1cm。 霍乱弧菌、拟态弧菌 碱性蛋白胨水 碱性琼脂(025040) 24h~48h 一个月 其它弧菌(副溶血性弧菌、创伤弧菌、河流弧菌、溶藻弧菌等) 3%NaCl碱性蛋白胨水 3%NaCl 营养琼脂 或3%NaCl TSA (025043) 24h~48h 一个月 霉菌、念珠菌、酵母菌 沙氏葡萄糖液体培养基 马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)(021050) 2d~5d 2~ 两个月 空肠弯曲菌 布氏肉汤 血平板(024070) 42± 42± 2~ 微需氧 一周 双歧杆菌 TPY肉汤 双歧杆菌琼脂(027330) 48h~72h厌氧培养 2~ 厌氧环境 一周 其它乳酸菌(乳酸杆菌、乳酸杆菌亚种、嗜热乳酸链球菌) MRS肉汤或脱脂乳溶液 灭菌脱脂乳或 MRS琼脂(027315) 24h~48h 2~ 一周 嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属 脑心浸液培养基 巧克力平板培养基 (普通)(029032) 48h~72h 5~10%CO2环境 2~ 5~10%CO2 环境 一周 军团菌 脑心浸液培养基 BCYE平板 (CP0020) 4d~7d 2~ 一个月 转接时用一次性接种环,不能使用酒精灯;如使用平板转接,培养时建议用牛皮纸或报纸包好,避免平板失水变干。