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13种不同的HEK293细胞你知道吗?你用的是哪种HEK293细胞?

发布时间:2025-03-07    浏览次数:51

人胚胎肾细胞系(HEK293)是通过用5型腺病毒(Ad5)DNA的剪切片段转化人胚胎肾(HEK)细胞使其永生化而产生的。据研究,Ad5基因组左臂的17% 基因被整合到转化的HEK细胞的19号染色体中。自创建以来,该细胞系已得到广泛表征,并开发了许多具有独特特性的衍生细胞系。这些细胞系包括HEK293T、HEK293E(EBNA)、HEK293-6E、HEK293F及其衍生物 HEK293FT和HEK293FTM、HEK293S和HEK293H,更多衍生的细胞系还有HEK293SG、HEK293SGGD(Glycodelete)、HEK293A、HEK293MSR等。

那么你都知道这些HEK293细胞的来源和特征吗?有什么区别?你用的又是哪种呢?

(1)HEK293细胞。HEK293是用5型腺病毒(Ad5)的E1A基因转化人胚胎肾细胞从而永生化的。该细胞比较容易转染,常用于外源基因的表达研究。HEK293细胞的缺点是贴壁性比较低,在实验过程中很容易丢失一些阳性细胞从而影响实验结果。

HEK293细胞

(2)HEK293S细胞。HEK293S适用于悬浮液生长,其后缀S的意思是Suspension,其可在改良的最小 Eagle培养基中悬浮生长。

HEK293S细胞

(3)HEK293T细胞。HEK293T是用编码SV40 大T抗原的温度敏感突变体的质粒稳定转染HEK293细胞系改造而来的。HEK293T可用于扩增含有 SV40 ori 的载体,能显著提高瞬时转染过程中的蛋白表达水平。该细胞的转染效率比HEK293更高,因此现在更多使用的HEK293T。

(4)HEK293FT细胞。HEK293FT是HEK293T的快速生长突变体。其表达来自 pCMVSPORT6TAg.neo 质粒的 SV40 大 T 抗原。HEK293FT专为慢病毒生产而设计。

(5)HEK293F细胞。HEK293F是从HEK293 细胞系克隆而来,并适应商业化培养基。其特征是生长快,转染率高。在化学成分确定的培养基中生长。

(6)HEK293H细胞。HEK293H是从HEK293克隆而来,以选择在噬斑测定过程中具有良好粘附性的克隆。后来适应了在无血清培养基(SFM)(GIBCO 293H) 中生长。其在SFM中生长快,噬菌斑检测粘附性好,转染效率高,蛋白表达水平高。

(7)HEK293E(EBNA)细胞。HEK293E(EBNA)表达 EBNA-1 蛋白,用于携带 oriP 质粒的游离型复制。其可扩增含有 oriP 的载体,显著提高瞬时转染过程中的蛋白表达水平。

(8)HEK293-6E细胞。HEK293-6E转染了EBNA1t ,EBNA1t是EBV EBNA1 的截短版本,缺乏 Gly-Gly-Ala 重复区。与HEK293-EBNA相比,HEK293-6E具有更强的重组蛋白生产能力。

(9)HEK293FTM细胞。HEK293FTM是通过在293细胞中稳定转染含有质粒的 FRT 位点和 TetR 表达质粒而来。通过共转染含有目标基因的 Flp-InTM 表达载体和 Flp 重组酶表达载体,用于快速、轻松地生成稳定转染的细胞库。

(10)HEK293SG细胞。HEK293SG是通过用甲磺酸乙酯(EMS)筛选的HEK293S衍生的具有蓖麻毒素抗毒素的克隆。缺乏N-乙酰葡糖胺基转移酶 I 活性(由 MGAT1 基因编码),因此主要用 Man5GlcNAc2 N-聚糖修饰糖蛋白。HEK293SG 用于生产均相 N-糖基化蛋白。

(11)HEK293SGGD(Glycodelete)细胞。HEK293SGGD(Glycodelete)来源于293SG,表达高尔基体靶向形式的endoT,endoT 是一种来自真菌里氏木霉的内切糖苷酶。HEK293SGGD 主要用于生产用于糖基化研究和结构分析的蛋白质。

(12)HEK293A细胞。HEK293A是具有相对平坦形态的HEK293细胞的亚克隆。其后缀A的意思是Adhere,HEK293A的贴壁性要强于HEK293细胞,且更容易形成单层细胞,不会存在细胞重叠和细胞间隙的情况,因此常用于病毒的空斑试验。HEK293A能促进复制缺陷腺病毒的初始生产、扩增和滴度测定。

(13)HEK293MSR细胞。HEK293MSR是由HEK293基因工程改造而来,用于表达人巨噬细胞清道夫受体。HEK293MSR可以牢固粘附于标准组织培养板,从而能够获得可靠的实验结果。

环凯细胞培养基

文章来源:环凯转载于“ 智者不学生物”公众号;原标题:“13种不同的HEK293细胞你知道吗?你用的是哪种HEK293细胞?”;作者~腌制油梨。
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