“细菌侦探”出动：高效检测三大病原菌
发布时间：2024-10-08 浏览次数：60 分享：
9月29日，最高人民法院发布涉产品质量典型案例，包括谢某生产、销售不符合安全标准的食品案获刑1年的案例。谢某因烤鸭店食品滋生细菌及食材过期，导致多人食物中毒。经检验，在当天抽检的 40 份单品中，11批次凉菜检测出“大肠菌群”“金黄色葡萄球菌”，17 批次“金黄色萄球菌”超出标准限值，鸡翅、烤鸭亚硝酸盐严重超标。
食物中的细菌污染一直是一个让人头疼的食品安全问题。别看这些细菌个头小，但它们可是能引起严重食物中毒的“坏家伙”。为了对抗这些“隐形敌人”，科学家们可是绞尽脑汁，想出了各种办法。今天，我们就来看看一项最新的研究，看看科学家们是如何用一种高效、灵敏的检测方法来同时检测燕窝、阿胶和枸杞中的三种常见细菌——沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的。
这项研究的主要目的是开发一种高效、灵敏、特异性强且操作简单的多重实时定量PCR（mRT-qPCR）方法，用于同时检测燕窝、阿胶和枸杞中的活沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。研究人员设计了针对目标基因invA、uidA和nuc的引物和探针，并通过丙啶单叠氮化物（PMA）处理排除死细菌的遗传物质，从而只检测活细菌。
研究方法
研究人员选用了几种不同的食品样本，包括燕窝、阿胶和枸杞。实验分为几个步骤：首先，研究人员将食品样本进行均质化处理，然后加入适量的细菌悬浮液，模拟实际污染情况；接着，样本经过PMA处理，以排除死细菌的遗传物质；再然后，研究人员从处理后的样本中提取DNA，确保只提取到活细菌的DNA；最后，研究人员设计了针对沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的特异性引物和探针，通过mRT-qPCR方法，研究人员能够同时检测这三种细菌的存在，并且能够区分活细菌和死细菌。
研究结论
经过多次试验，研究人员得出了以下结论：
1、高效性：这种方法能够在短时间内同时检测出三种细菌，检测效率高；
2、灵敏性：这种方法能够检测到低至10^2 CFU/ml的沙门氏菌和大肠杆菌，以及10^1 CFU/ml的金黄色葡萄球菌；
3、特异性：这种方法能够特异性地检测目标细菌，不会受到其他非目标细菌的干扰；
4、可靠性：通过PMA处理，这种方法能够可靠地区分活细菌和死细菌，回收率在95.7%到105.6%之间。
这项研究表明，PMA结合mRT-qPCR技术是一种高效、灵敏、特异性强且操作简单的方法，适用于同时检测食品中的多种病原菌。未来，科学家们可以继续优化这种方法，进一步提高其检测效率和灵敏度。此外，这种方法还可以应用于其他食品和药品的微生物检测，为食品安全提供更有力的保障。
参考文献：Liang, Taobo,Long, Hui,Zhan, Zhongxu,et al.Simultaneous detection of viable Salmonella spp., Escherichia coli, and Staphylococcus aureus in bird's nest, donkey-hide gelatin, and wolfberry using PMA with multiplex real-time quantitative PCR[J].FOOD SCIENCE & NUTRITION,2022,10(9):3165-3174.
来源：微生物安全与健康网，作者~凌纪云。
