实验室用水的精准辨析：从无菌水、无酶水到超纯水的选择依据
发布时间：2025-11-19 浏览次数：99
在实验室中，水是最基础却至关重要的试剂，无论是溶解样品、配制溶液还是清洗仪器，不同实验对水质的要求各不相同。去离子水、无菌水、双蒸水、超纯水……这些名称背后，代表着不同的纯度等级和适用场景。本文将系统梳理常见实验室用水的制备方式、特点与用途，助你精准用水、规范实验。
一、无菌水
制备方式：通常采用高压蒸汽灭菌（121℃，20–30分钟）或0.22 μm微孔滤膜过滤去除微生物。
特点：不含微生物，但并非无酶、无热原。不能直接用于对核酸酶敏感的实验。
实验用途：
● 细胞培养相关试剂的配制（如胰酶溶解）；
● 微生物实验中的稀释液；
● 需无菌但不要求去酶、去内毒素的一般实验。
二、无酶水
制备方式：经特殊处理（如DEPC处理、超滤或商品化无酶水工艺）去除DNA酶、RNA酶和蛋白酶。
特点：无核酸酶活性，适用于对酶污染敏感的实验。
实验用途：
● RNA提取、RT-PCR、cDNA合成；
● 核酸保存与稀释；
● 酶反应体系的配制。
三、DEPC水
制备方式：在超纯水中加入0.1% DEPC（焦碳酸二乙酯），混匀静置后高温高压灭活残留DEPC。
特点：有效灭活RNase，但DEPC本身具有毒性，需注意操作防护。
实验用途：
● RNA相关实验试剂配制；
● 实验器皿的RNase去除处理；
● 分子生物学中防RNase污染的体系构建。
四、去离子水
制备方式：通过离子交换树脂去除水中阴、阳离子。
特点：电导率低，无机离子含量少，但可能含有有机物、细菌或颗粒物。
实验用途：
● 常规化学试剂配制；
● 玻璃器皿清洗；
● 对无机离子敏感的分析实验。
五、蒸馏水
制备方式：通过加热蒸发再冷凝获取，去除非挥发性杂质和部分微生物。
分类：
● 单蒸水：经一次蒸馏，仍可能含有少量挥发性有机物和二氧化碳。
● 双蒸水：经两次蒸馏，纯度更高，热原和离子含量进一步降低。
实验用途：
● 常规溶液配制；
● 器皿清洗；
● 普通理化分析。
六、超纯水
制备方式：在去离子水基础上，结合RO（反渗透）、UV氧化、超滤等集成纯化技术，去除离子、有机物、颗粒物、细菌和核酸酶。
特点：电阻率可达18.2 MΩ·cm，TOC（总有机碳）含量极低，几乎无微生物和酶活性。
实验用途：
● 高效液相色谱（HPLC）、液质联用（LC-MS）等高端分析；
● 细胞培养、胚胎操作等生命科学实验；
● 分子生物学、电泳、定点突变等高精度实验。
七、反渗水
制备方式：通过高压使水透过反渗透膜，去除绝大部分离子、有机物和微生物。
特点：纯度介于自来水与去离子水之间，常作为纯水系统的前处理水源。
实验用途：
● 清洗器皿、作为初级实验用水；
● 实验室清洗机、灭菌锅等设备用水。
总结：实验室用水选用指南
| 水质类型 | 主要特点 | 典型应用场景 |
| 无菌水 | 无微生物，可能有酶、热原 | 细胞培养试剂配制、微生物实验 |
| 无酶水 | 无核酸酶，无菌级可选 | RNA实验、cDNA合成、酶反应体系 |
| DEPC水 | 无RNase，DEPC残留需去除 | RNA实验体系配制、器皿去RNase处理 |
| 去离子水 | 无机离子少，可能含有机物/菌 | 常规试剂配制、器皿清洗、无机分析 |
| 蒸馏水 | 非挥发性杂质少，热原可能残留 | 普通理化实验、教学实验、器皿冲洗 |
| 超纯水 | 综合纯度最高，近乎绝对纯净 | HPLC/LC-MS、细胞培养、分子克隆、高精度分析 |
| 反渗水 | 初级纯水，适合一般清洗与前处理 | 设备用水、器皿初步清洗、纯水系统进水 |
选用原则：根据实验的“灵敏度”选择相应级别的水质。常规清洗可用反渗水或蒸馏水；生化与细胞实验建议使用无菌水或无酶水；涉及核酸和高端仪器时，务必选用超纯水或DEPC水。
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