细胞喂养指南：手把手教你配制DMEM完全培养基
发布时间：2025-11-24 浏览次数：23
导语： 养细胞就像养孩子，一口好“饭”至关重要！今天，小编就带大家走进细胞房的“中央厨房”，揭秘细胞营养大师——DMEM完全培养基的配制流程。每一步都关乎细胞的生死存亡，快来一起学习吧！
完全培养基的定义
完全培养基（Complete Medium）是指在基础培养基（Basal Medium）的基础上，添加了满足特定细胞生长、增殖及功能维持所需的全部补充成分的培养基。它是细胞体外培养（如贴壁细胞、悬浮细胞培养）中最常用的培养体系，核心作用是模拟细胞在体内的生长微环境，为细胞提供 “一站式” 营养支持。
完全培养基的组成
完全培养基一般由以下三种组成：
| 名称 | 基础培养基 | 血清（FBS） | 双抗（青霉素、 链霉素） |
| 存储温度 | 4°C | -20°C | -20°C |
最常用的完全培养基配置比例是：10%FBS+1%双抗+89%基础培养基。
DMEM完全培养基的配制
♦ 准备工作：将冻存的FBS和双抗在37℃水浴锅中解冻。注意，水面不要超过瓶盖，防止污染。将所需的所有物品（培养基、FBS、双抗、移液管等）用75%酒精喷洒后，移入已紫外杀菌过的生物安全柜中。
♦ 核心步骤：配制完全培养基
从一瓶全新的DMEM基础培养基中，用无菌移液管吸出44.5mL，加到离心管中。
用移液器分别吸取5mL胎牛血清和0.5mL双抗至离心管中。
♦ 混合、分装与储存
拧紧瓶盖，用手腕的力量轻柔地颠倒混匀。避免剧烈摇晃产生大量泡沫。在瓶身上用记号笔清晰地标记好：DMEM完全培养基+10%FBS+1%双抗，配制日期。用封口膜（Parafilm）将瓶口密封，放入4°C冰箱避光保存。
♥ 重要提示：整个配制过程，双手和所有操作都必须在生物安全柜内进行。任何一个环节的疏忽，都可能导致你的细胞“团灭”。
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