产品名称:细菌基因组 DNA 纯化试剂盒(磁珠法)
英文名称:Bacterial DNA purification kit (Magnetic bead)
产品编号与包装规格:
编号 | 产品名称 | 规格 |
TQ001D1 | 细菌基因组 DNA 纯化试剂盒(磁珠法) | 16T/板×2 板 |
产品简介:用于各种细菌样本中纯化高纯度的 DNA,其原理是利用裂解液裂解释放基因组 DNA;随后利用蛋白酶 K 降解膜蛋白和缠绕DNA 的核蛋白,使 DNA 充分游离;游离的 DNA 特异性地吸附到磁珠上,通过电磁进行捕获和转移并在深孔板中振荡进行杂质清除;最后洗脱液将 DNA 从磁珠上洗脱达到纯化目的。
储存条件及有效期:2~8℃保存,有效期 12 个月,请在有效期内使用。
适用仪器:全自动核酸提取仪或工作站,部分产品可能因加热槽的位置可能存在不兼容,使用前请仔细阅读说明书或咨询售前。
试剂盒组成:
序号 | 产品组成 | 规格 |
1 | 96 孔预封装深孔板 | 16T/板,2 板 |
2 | 溶菌 | |
3 | 溶菌酶缓冲液 | |
4 | 蛋白酶 K | |
5 | 蛋白酶 K 缓冲液 | |
6 | 悬浮液 | |
7 | 使用说明书 | 1 份 |
样本要求:新鲜细菌培养液或菌落悬浮液。
细菌基因组 DNA 纯化试剂盒(磁珠法) 使用方法:
● 初次使用前请在去蛋白缓冲液和漂洗液中加入无水乙醇,参见瓶身标签或使用说明书。
1,吸取 1~2 mL 对数生长期细菌培养液于 1.5 mL 离心管中。12,000 r/min 离心 1 min,尽量吸除上清。
2,对革兰氏阴性菌,向离心得到的菌体沉淀中加入 200 μL悬浮液,涡旋振荡至充分悬浮。
3,对革兰氏阳性菌,需加入溶菌酶辅助破壁处理。具体方法为:向步骤 1 中收集的菌体沉淀加入 120 μL 悬浮液,充分悬浮后加入 80 μL 的溶菌酶,37℃水浴 30 min。
● 未知菌落按照革兰氏阳性菌处理。
4,如需要去除 RNA,可加入 4 μL RNase A (100 mg/mL)溶液,震荡混匀后,室温放置 5 min。5,加入 20 μL 蛋白酶 K,55℃水浴 30 min。
5,加入 20 μL 蛋白酶 K,55℃水浴 30 min。
6,从试剂盒中取出预装板后,颠倒数次使磁珠重悬混匀。手动拍甩预装板或使用板式离心机进行离心(500 rpm离心 1min),使试剂和磁珠集中到孔板底部。使用前小心撕去铝箔封口膜,防止液体溅出。
7,在 96 深孔板的第 1 列和第 7 列每孔中分别加入 200 μL样本(样本不足 200 μL 时加入无酶水补至 200 μL)和30 μL 蛋白酶 K,加样时尽量将移液枪头插入孔底,避免样液残留在板壁上。
8,将准备好的 96 深孔板放置在 32 通道核酸自动提取仪的深孔板底座上,并将 8 孔磁棒套插入磁棒套卡槽内。
9,打开仪器操作软件,选择或设置核酸自动化提取程序(具体参数如下表),如需要手动设置,按照下列程序进行设置:
10,自动化程序结束后,取出 96 深孔板,第 5 列及第 11 列的液体即为提取的核酸溶液,转移到干净的离心管中,置于-20 ℃保存(长期保存应置于-80 ℃)。