产品名称:水生动物病原 DNA/RNA 提取试剂盒(硅胶膜吸附柱法)
英文名称:Aquatic Animal Pathogen DNA/RNA Extraction Kit
产品编号与包装规格:
编号 | 产品名称 | 规格 |
TQ001AH2 | 水生动物病原 DNA/RNA 提取试剂盒(硅胶膜吸附柱法) | 50 份/盒 |
产品简介:本试剂盒利用特制的裂解液和特异性吸附核酸的硅胶膜离心吸附柱,可以快速简单地从各种水生动物组织样本中得到高质量的病原体(病毒、致病菌)DNA 或 RNA。提取获得的 DNA/RNA 纯度高、质量稳定,适用于各种常规分子实验操作,包括反转录、PCR、RT-PCR、LAMP 检测等。
试剂盒组成:
序号 | 产品组成 | 规格 |
1 | 裂解液 | 30 mL |
2 | 蛋白酶 K | 1 mL |
3 | 去蛋白缓冲液 | 24 mL(使用前加 16 mL 无水乙醇) |
4 | 漂洗液 | 15 mL(使用前加 60 mL 无水乙醇) |
5 | 洗脱液 | 10 mL |
6 | 硅胶膜吸附柱(RNase-Free) | 50 套 |
储存条件及有效期:室温保存,有效期一年,2~8 ℃条件下储存更佳,储存过程中若溶液产生沉淀,使用前将其在室温放置一段时间或 37 ℃条件下温育,待充分溶解后摇匀即可使用。蛋白酶 K 于 2~8 ℃储存(-20 ℃长期保存)。
用户自备材料与工具:
水生动物病原 DNA/RNA 提取试剂盒(硅胶膜吸附柱法)使用方法:
● 初次使用前请确保去蛋白缓冲液和漂洗液中已按说明加入指定量的无水乙醇。
1、取适量的待检水生动物组织样品加入 1~5 倍体积的生理盐水进行匀浆。
2、取 200 μL 匀浆液至 1.5 mL 离心管中,加入 500 μL 裂解液、20 μL 蛋白酶 K,涡旋振荡混匀,65℃孵育 15 min。
3、12000 rpm 离心 2 min,小心吸取 400 μL 上清液至一个新的 1.5 mL 离心管中,加入 250 μL 无水乙醇,涡旋振荡混匀,室温静置 3 min。
4、将上一步的全部液体加入到硅胶膜吸附柱上(吸附柱套入收集管中),12000 rpm 离心 1 min,倒掉滤液,吸附柱套回收集管。
5、加入 500 μL 去蛋白缓冲液,12,000 rpm 离心 1 min,倒掉滤液,吸附柱套回收集管。
♦(去蛋白缓冲液初次使用前加入 16 mL 无水乙醇。)
6、加入 500 μL 漂洗液,12,000 rpm 离心 1 min,倒掉滤液,吸附柱套回收集管。
♦ (漂洗液初次使用前加入 60 mL 无水乙醇。)
7、重复步骤 6。
8、再次 12,000 rpm 离心 2 min,彻底去除吸附柱中残留的液体。将吸附柱套入新的 1.5 mL 离心管中,打开盖子,室温放置 2 min,去除残留的乙醇。
9、向吸附柱中央处悬空滴加 50~100 μL 洗脱液,室温静置 5 min,12,000 rpm 离心 2 min,离心所得液体即为待检病原核酸溶液。短期保存可置于-20 ℃,长期保存应置于-80 ℃。
注意事项:
1、实验前请仔细阅读本试剂盒说明书,严格按操作步骤执行。
2、本试剂盒提取所使用的一次性离心管和吸头应经过高压灭菌,且不含 DNase 和 RNase。
3、裂解液中含有胍盐类蛋白变性剂,应避免直接接触皮肤,如有接触请用大量清水冲洗。
4、实验后妥善处理所有样本和试剂材料,彻底清洁和消毒操作台面。