细菌新型生化鉴定管使用说明
―― 大肠埃希氏菌 O157：H7/NM 生化鉴定盒（GB/T 4789.36-2008, 14 种×10 次）
一）整套试剂及用品
鉴定生化反应的 14 种试剂（表 1）、10 瓶 0.85%无菌生理盐水、1 瓶 0.5 McFarland 的浊度管、10 支一次性吸管。
二）西林瓶的使用方法
开启西林瓶前，用 75%酒精棉消毒西林瓶表面，在无菌条件下，按铝盖上的箭头方向打开铝盖，撕开铝盖，打开西林瓶胶塞（如图1）。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
三）大肠埃希氏菌 O157：H7 生化鉴定盒的详细使用方法
大肠杆菌 O157：H7 为革兰氏阴性杆菌，需氧或兼性，有周鞭毛，并有菌毛，不产生芽孢的杆菌。发酵乳糖，不发酵或迟缓发酵山梨醇；氧化酶阴性；MUG 阴性。
从分离培养平板上挑取可疑菌苔接种于营养琼脂平板上分纯，于 35－37℃培养 18-24h，挑取菌落置于已配备的无菌生理盐水中，与 0.5 McFarland的浊度管比浊，将菌悬液制备成 0.5McFarland ( 约 108cfu/mL )，用吸管吸取 2 滴（约 0.06mL）菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的 西林瓶再套上胶塞，一般采用全加塞（如图 2 左两瓶所示），特殊情况在下表注明采用半加塞（如图 2 右两瓶所示），直立于内托的凹槽内（如图 2），或放置于合适的瓶架中，于 35－37℃培养箱中培养，结果观察见表 1。
注意：如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式，请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
四）出血性大肠杆菌 O157：H7 的生化鉴定程序（见下图）和生化鉴定特征（见表 2）
出血性大肠杆菌 O157：H7 生化鉴定程序图：
在营养琼脂平板上挑取分纯的菌落，用 O157：H7 标准血清或 O157 乳胶凝集试剂测试，对于 H7 因子血清不凝集者，应穿刺接种半固体琼脂，检查动力，经连续传代 3 次，动力试验阴性，H7 因子血清凝集阴性者，确定为无动力株。
