革兰氏染色液
【产品用途】
革兰氏染色液用于细菌革兰氏染色实验。
【检验原理】
通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此，能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。
【配方成分】
1、结晶紫染色液
配方（每瓶） 含量
结晶紫 0. 1g
95％乙醇 2mL
1％草酸铵水溶液 8mL
2、革兰氏碘液
配方（每瓶） 含量
碘 0.033g
碘化钾 0.067g
蒸馏水 10mL
3、脱水酒精
配方（每瓶） 含量
95％乙醇 10mL
4、沙黄复染液
配方（每瓶） 含量
沙黄 0.025g
95％乙醇 1mL
蒸馏水 9mL
【使用方法】
1、将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液。染1min，水洗。
2、用空瓶装所需的革兰氏碘液，临用时滴加革兰氏碘液，作用1min。水洗。。用剩碘液应及时再装回棕色玻璃瓶中。
3、滴加脱色酒精，约30s；或将脱色酒精滴满整个涂片，立即倾去，再用95%酒精滴满整个涂片，脱色10s。
4、水洗，滴加沙黄复染液，复染1min，水洗，待干，镜检。
5、结果：革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
【质量控制】
指标 | 质控菌株及编号 | 特征性反应 |
特征观察 | 大肠埃希氏菌 ATCC25922 | 革兰氏阴性，镜下呈红色，短杆状 |
金黄色葡萄球菌 ATCC6538 | 革兰氏阳性，镜下呈紫色，球状 |
