产品用途
单增李斯特显色培养基用于分离和初步鉴别单增李斯特菌。
检验原理
蛋白胨、酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;色素与单增李斯特氏菌具有的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在平板上,单增李斯特氏菌呈现绿~蓝绿色的光滑规则的小菌落;抑制剂和配套试剂可抑制杂菌的生长。
单增李斯特显色培养基配方成分
配方(每升) | 含量 |
---|---|
蛋白胨 | 15.0g |
蛋白胨 | 15.0g |
蛋白胨 | 15.0g |
蛋白胨 | 15.0g |
使用方法
1、称取单增李斯特显色培养基干粉47.3g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,充分溶解,121℃高压灭菌15min,冷至50℃左右。
2、取10支配套试剂分别加入1mL无菌水,使之完全溶解。
3、将配套试剂加入到已冷至48℃左右基础培养基中,充分混匀后倾注无菌平皿。
4、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液,进行增菌培养后,用接种环取1环增菌液,划线接种于显色平板上,置于36±1℃培养24-48小时。
5、观察结果。致病性李斯特24h后开始出现蓝绿色,至36~48h蓝绿色明显。挑取显色平板上呈蓝绿色光滑规则,直径约1~2mm的可疑单菌落进行进一步的试验。
6、对疑似单增李斯特氏菌菌落可使用HK-MID Listeria或API20E或生化管进行下一步的鉴定。
注:如产品类型为干粉,按上述1-6进行操作;若为即用型平板,按4-6进行操作即可。
质量控制
1、外观方面
干粉基础:流动性良好的淡黄色粉末。配套试剂:淡黄色冻干粉。
制备好平板:淡黄色不透明凝胶。
2、生物学方面
下列菌株接种单增李斯特氏菌显色培养基后于36±1℃培养24-48h生长情况如下表:
质控菌株及编号 | 指标 | 标准值 | 特征性反应 |
---|---|---|---|
单增李斯特氏菌ATCC19115 | 生长率 | PR≥0.5 | 蓝绿色光滑规则小菌落,直径1.5-2㎜ |
单增李斯特氏菌ATCC19115 | 生长率 | PR≥0.5 | 蓝绿色光滑规则小菌落,直径1.5-2㎜ |
储存条件及保质期
干粉培养基:2~8℃避光保存,用后立即旋紧瓶盖。贮存期两年。
配套试剂:2~8℃避光保存。贮存期两年。
即用型平板:2~8℃避光保存,最多一周。
注意事项
1、称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。
2、干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。
3、自制平板时需注意培养基的厚度,厚度过薄容易造成琼脂水分保持性下降,开裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)体积培养基,平板培养基厚度至少为2mm。
4、即用型成品平板应该尽量保持在2-8℃下保存且与存放容器冷凝管保持一定距离以避免冻损坏。产品多次在低温与常温之间变更会引起琼脂的泌水,属于正常现象。使用前应平衡至室温且尽量在无菌干燥箱中预干燥。
5、质检报告可以登录环凯网站http://www.huankai.com,打开“客服中心”页面,输入产品批号下载。
废物处理
检测之后带菌平板置于121℃下高压灭菌30分钟后处理
执行标准
Q/HKSJ 03 普通微生物培养基